Der Regionalverband Hamburg ist über die Grenzen der Hansestadt hinaus auch für die Landkreise Pinneberg und südliches Segeberg verantwortlich. Bei den zahlreichen Veranstaltungen in Hamburg wie zum Beispiel dem Hafengeburtstag, dem G-Move oder unterschiedlichen Sportveranstaltungen sorgt der Sanitätsdienst der Johanniter für die Sicherheit der Besucher und Teilnehmer. Mit ihrem Angebot in der Jugendarbeit bietet die Hilfsorganisation Kindern und Jugendlichen Anregungen für eine sinnvolle Freizeitgestaltung. Außerdem zeigen die Johanniter ihnen Möglichkeiten für eine berufliche Orientierung und Qualifizierung. An 365 Tagen im Jahr liefert der Menüservice der Johanniter warme Speisen ins Haus. Viele Hamburger fühlen sich dank des Hausnotrufes und dem ambulanten Pflegedienst gut versorgt in den eigenen vier Wänden. 

Über 300 hauptamtliche Mitarbeiterinnen und Mitarbeiter und rund 800 ehrenamtliche Helferinnen und Helfer sind für den Dienst am Nächsten tätig. Um weiterhin ihre vielfältigen Aufgaben erfüllen zu können, sind die Johanniter auf Spenden angewiesen. Sie kommen überwiegend dem Schulsanitätsdienst, dem Seniorencafe, dem ambulanten Hospizdienst, der Kleiderkammer oder der Katastrophenhilfe zu Gute.